经过我们（men）多（duō）年生产（chǎn）实践（jiàn）栽培总结出来的经（jīng）验是选用当（dāng）年表现优异的羊肚菌子实体进行组织分离以后，再繁（fán）育出来的菌种进行栽（zāi）培播（bō）种，由（yóu）于转（zhuǎn）代次数少（shǎo），变异性概率低。再进行（háng）播种，基本可以保障稳定的（de）出菇率。综上所述（shù），掌握成熟的羊肚菌育种技（jì）术是必要的。以（yǐ）下为（wéi）大家详细（xì）的介（jiè）绍羊（yáng）肚（dù）菌菌种分离及提纯复（fù）壮技（jì）术（shù）：
一，选种菇  正（zhèng）常情（qíng）况在清晨还没有浇水之前采摘（zhāi）6分（fèn）熟的（de），没有病（bìng）害感染，虫害咬食的健康羊肚菌作为种菇，还要看菇形与其母本的外（wài）观（guān）形态相似度（dù）越高越（yuè）好。采（cǎi）菇（gū）以（yǐ）后不要带土（tǔ）装入塑（sù）料袋中，根（gēn）据不同（tóng）品种写好标签。
二（èr），种菇处理  将采到的种菇进行测量，称重（chóng），并做好详细（xì）记录，测试种菇高，菌柄（bǐng）直径（jìng），菌帽直径，和菌帽（mào）高度。

三，准（zhǔn）备工（gōng）作  将制备（bèi）好的PDA 培养基试管，无（wú）菌水，储水罐，酒精棉，无菌棉摄子（zǐ），酒精（jīng）灯，火机，种菇等物品放（fàng）到无菌操作台上，将杀菌灯开好，无菌风机（jī）同时打开，20分钟后就可（kě）以进行分离羊肚菌菌种的操作了。也可以在接种箱中进（jìn）行（háng），把上述物品（pǐn）全部放入接种箱。接（jiē）种箱封闭（bì）好（hǎo）以后用（yòng）二氯异氰悄酸纳薰蒸30分钟（zhōng）即可开始分离羊肚菌菌种的工作了。

四，分离菌（jun1）种（zhǒng）  1，带好手（shǒu）套，伸入无菌操作台的无菌区，或接（jiē）种箱（xiāng）内，先（xiān）用酒精棉球（qiú）对双手手套外表进行彻底擦（cā）拭（shì）消毒，然（rán）后用无菌水对羊肚菌种菇进行冲洗冲洗（xǐ）过程（chéng）的水倒（dǎo）入储水罐中，内外都要冲洗（xǐ），冲洗时间为2-3分钟，冲洗以后用无菌棉吸干羊肚（dù）菌（jun1）表面水分。然后将攝子用酒精棉消毒处理（lǐ）以后，放在酒精灯火（huǒ）焰顺风（fēng）方向燃（rán）烧消毒（dú），再（zài）将羊肚菌菌帽与菌（jun1）柄处掰断，将菇帽部分放到一边，只用菌柄部（bù）分，再拿（ná）起一支试管（试管（guǎn）和菌柄同（tóng）时用（yòng）左手拿好，在酒精灯火焰顺风（fēng）处取（qǔ）下（xià）棉（mián）塞，棉塞（sāi）夹（jiá）在右手中指和无（wú）名指之间，注意塞入试管（guǎn）部分（fèn）的棉塞向（xiàng）外，不要与手接触，右手的拇指（zhǐ）和食指拿摄子夹取菌柄与菌帽断（duàn）开处的3毫（háo）米见方（fāng）的一块羊肚菌组织，接入试（shì）管斜面培（péi）养基前端，塞好棉塞，放在旁边，注意（yì）始终保持（chí）试（shì）管培养基平面向（xiàng）下，轻拿（ná）轻（qīng）放。然后再进行下一支试管的操作。

五，培（péi）养  将分离好（hǎo）的菌种贴好（hǎo）标（biāo）签：标签内容包括日（rì）期，品种名称（chēng）等（děng）信息。然后就可（kě）以放在（zài）20-23度（dù）的（de）条件下恒温培养。注意（yì）每（měi）天观察长势，杂菌感染严（yán）重（chóng）的及时（shí）挑出。感染轻微（wēi）的可（kě）以保留进行提纯处理。

六，提纯  在分离的过程中，难免有（yǒu）杂菌感染，根据（jù）羊肚菌菌（jun1）丝（sī）生长速度快的特（tè）点，即使有羊（yáng）肚（dù）菌菌丝与杂菌共同萌发生长，经过三天培养，羊肚菌菌丝（sī）长势会（huì）超（chāo）过杂菌一大截（jié），遇到这种（zhǒng）情况（kuàng）时就可以进（jìn）行提（tí）纯处理：
1，准（zhǔn）备工作：准（zhǔn）备提纯的菌种，空（kōng）PDA试管培养（yǎng）基，酒（jiǔ）精灯，酒精棉，接（jiē）种钩，火机。消（xiāo）毒（dú）处理和上述方法一致。
2，提纯流程（chéng）  戴（dài）好手（shǒu）套，用酒精棉擦拭消（xiāo）毒，将接（jiē）种钩擦拭消毒，然后在（zài）酒（jiǔ）精灯火（huǒ）焰顺风方向取下等（děng）待提纯（chún）菌种试管棉塞，用接种钩在酒（jiǔ）精灯火焰处灼烧消（xiāo）毒处理以后将原来接入的已经感染（rǎn）杂菌（jun1）的组织块部位（wèi）的（de）培养基一同钩出试管，没有（yǒu）感染杂菌长有羊肚菌菌（jun1）丝的培养基保留1-2厘米（mǐ）即可。注（zhù）意接种钩尽量不要接触到杂菌感染的部（bù）分。然后仔细对（duì）接种钩进行（háng）彻底消毒处理以（yǐ）后就可以取保留的（de）羊肚菌纯菌（jun1）丝接入（rù）新的PDA培养（yǎng）基中（zhōng），大小以3毫米见方一块为宜。然后将（jiāng）提纯后（hòu）的试管贴好（hǎo）标（biāo）签，做好记（jì）录。再放到20-23度进行恒（héng）温（wēn）培养。
七，菌种保藏   分离，提（tí）纯好的（de）羊肚菌（jun1）菌种以后需要及时进行菌种保藏处理，具体请参照菌（jun1）种（zhǒng）保藏方（fāng）法 在（zài）适当的季节（jiē）进行（háng）出菇栽培实验（yàn）。